DETERMINAÇÃO DO EFEITO DA NEOSAXITOXINA NA NEUROTRANSMISSÃO MOTORA DO NERVO FRÊNICO-DIAFRAGMA DE CAMUNDONGO
DETERMINATION OF THE EFFECT OF NEOSAXITOXIN ON MOTOR NEUROTRANSMISSION OF THE MOUSE PHRENIC NERVE-DIAPHRAGM
Resumo
Objetivos: A neosaxitoxina é um bloqueador reversível de canais de sódio dependentes de voltagem, que tem despertado interesse clínico devido à sua duração mais prolongada em relação aos anestésicos locais, além de efeitos anti-inflamatórios. Objetivou-se avaliar in vitro a curva dose-resposta da NeoSTX em nervo frênico de camundongos, para determinação da dose efetiva para o estabelecimento de bloqueio neuromuscular.
Materiais e Métodos: Foram utilizados oito camundongos machos da linhagem Unib:SW, eutanasiados com isoflurano e submetidos à exsanguinação. Foram isolados os hemi-diafragmas e respectivos nervos frênicos, e as preparações montadas em sistema miográfico com solução Tyrode a 37 °C, sob aeração com carbogênio. As hemipreparações foram tensionadas a 1 g/cm e estimuladas com pulsos supramaximais (0,1 Hz; 0,2 ms), sendo registradas por transdutores isométricos e sistema LabScribe4. Após estabilização das respostas contráteis, foram aplicadas concentrações crescentes de neosaxitoxina (NeoSTX) (32 nM a 3,2 μM). Os dados numéricos foram expressos como a média ± D.P.M., com as comparações estatísticas sendo feitas usando o teste t de Student para comparações com o basal. O valor de p < 0.05 indicou significância.
Resultados: O protocolo de cinética mostrou o potencial bloqueador da NeoSTX a partir de 32 40 nM, permitindo-se a estabilização das respostas contráteis por aproximadamente 10 minutos antes de aumentar proporcionalmente a concentração da toxina na cuba de registro. O bloqueio neuromuscular completo foi alcançado em 120 minutos, quando a concentração de NeoSTX atingiu 3,2 μM na cuba de registro. Nessa concentração (3,2 μM), o tempo necessário para detecção de 50% e 90% de bloqueio foi 8,8 ± 1,5 e 12,9 ± 2,8 minutos, respectivamente.
Conclusões: Os achados deste estudo demonstram que a concentração de 3,2 μM de NeoSTX promove bloqueio completo da neurotransmissão motora do nervo frênico-diafragma de camundongo de forma eficaz e reversível.
Protocolo CEUA: 8242/2023.
Fonte de Fomento: FAPESP - Auxílio Regular, Processo no 2023/07815-5; CAPES - Bolsa de Doutorado, Processo no 88887.715749/2022-00.
